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液相色譜使用要求有哪些?
點擊次數(shù):3549 更新時間:2021-03-03
液相色譜儀是利用混合物在液-固或互不相溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離而后分析鑒定的儀器,應(yīng)用極其廣泛。此種儀器在使用過程中,難免會出現(xiàn)各種各樣的問題,并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準確性和儀器的正常工作。因此,在使用維護過程中,對液相色譜儀的要求:

1.流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細的膜過濾)。 

2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
3.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進液。
4.使用緩沖溶液時,做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
5.長時間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
7.C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8.堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:

①以異丙醇作溶劑沖洗;

②放在異丙醇中間用超聲波清洗;

③用10%稀硝酸清洗;
9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10.如果進液管內(nèi)不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

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